本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法定量检测小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒仅供科学研究，不用于临床诊断。

分析类型：夹心ELISA

样本类型：血清、血浆、组织、尿液、及相关液体等样本

产品型式：48/96孔板，可拆

贮存方法：试剂盒未拆开，4℃保存。已拆开，标准品-20℃保存，其它4℃保存。

运输条件：4℃

样本体积：50μl

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒试验原理：

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒自备材料

1）蒸馏水。

2）酶标仪(450nm）

3）高精度加样及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

4）振荡器及磁力搅拌器等。5）37℃恒温箱。

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒安全性

1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒样品收集、处理及保存方法

1）血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆－－－－-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液－－-1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆－－－－-将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存－－－－－－如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒试剂的准备

1）标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。

2）洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒操作步骤

1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9）在450nm波长处测定各孔的OD值。

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒局限

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒性能

1. 灵敏度：*小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒结果判断与分析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的待测物质标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)科研elisa试剂盒实验原理: 用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP-标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色， 并在酸的作用下转化成*终的黄色。 颜色的深浅和样品中的目标蛋白呈正相关。用酶标仪在（450nm）波长下测定测定OD值（吸光度），计算样品浓度。

更新时间：2024/9/13 17:43:02